hGeCKO Library AB#1 in 293T


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培养体系

转染专用培养基

单克隆生长培养基

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试剂盒

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EZ-Detect™支原体检测试剂盒

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hGeCKO Library AB#1 in 293T

EZ-editor™ 人全基因组敲除文库(单质粒系统A+B)

产品名称：hGeCKO Library AB#1 in 293T

细胞：293T

货号： LIBR-H002AB-C300D22

细胞覆盖度 ： 300x

说明书：

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产品详情 推荐搭配
Ubigene CRISPR文库细胞应用了CRISPR iScreen™技术，用自主研发的高效感受态制备覆盖度高和均一性好的文库质粒，再用慢病毒包装试剂盒YK-LVP-20进行病毒包装，获得高滴度的CRISPR文库病毒，最后经过源井独家Cell Pool工艺，用低病毒MOI感染目的细胞系，控制每个细胞只进一个病毒，批量构建标准化的CRISPR文库细胞。Ubigene CRISPR文库细胞批间差异小、重复性好，对其进行不同的压力条件筛选，可筛选到适用于不同领域研究的靶基因。
文库名称
EZ-editor™ 人全基因组敲除文库(单质粒系统A+B)
产品名称
hGeCKO Library AB#1 in 293T
细胞
293T
物种
Human
细胞形态
上皮样, 贴壁细胞
药筛浓度
Puromycin 1μg/mL
培养体系
90% DMEM+10%FBS
靶向基因
19050
gRNA数量
123411
非靶标对照sgRNA数量
1000
细胞图片
细胞图片
细胞接收
EZ-editor™ CRISPR 文库稳转株均以冻存细胞的形式进行运输，收到后请立即转入液氮储存或短暂（24H)放至-80℃冰箱保存，或直接进行细胞复苏。
CRISPR iScreen™产品优势
  • 35种文库
    近100种Cas9细胞
    35种文库现货供应，多种类型可选。Cas9细胞代次低、活性高、状态好，轻松加快CRISPR文库构建。
    1
  • 质粒
    覆盖度>99%,均一性＜10
    使用自主研发感受态细胞，更易捕获外源DNA，转化效率高且突变风险低。
    2
  • Cell Pool
    覆盖度高达99%
    独家Cell Pool制备工艺,实现规模化、标准化生产，确保批间差异小、重复性好。
    3
FAQs
1
文库细胞cell pool如何质控，质控标准是什么？
文库细胞cell pool需要通过NGS测序检测sgRNA的覆盖度，一般sgRNA覆盖度需>90%，此外，源井生物文库细胞cell pool现货会进行菌检、支原体检测以及细胞复苏验证等环节，确保细胞高质量交付。
2
为什么要选择病毒感染效率为30%的MOI作为文库细胞构建实验的病毒感染条件？
在文库细胞构建时，应尽可能保证每个细胞只进入一条sgRNA。细胞存活比例为30%意味着约30%的细胞被病毒感染，这种情况下一个细胞被多个病毒感染的概率大大降低。
3
交付的文库细胞cell pool可以再继续扩增吗？
文库细胞cell pool可以继续扩增，但是建议扩增代次不超过5代，如果扩增代次过高会导致文库细胞中的sgRNA覆盖度降低。
4
pool细胞扩增，加压的时候是否需要加抗性培养，半药维持？
文库pool细胞扩增过程中可使用抗性培养，确保扩增完成的细胞中无野生型细胞；在加压过程中不建议使用抗性培养，避免抗生素对实验结果造成影响。
5
怎么计算病毒感染所需的野生型细胞数量？
文库转染所需野生型细胞量计算方法如下: 细胞量 = gRNA数量 * gRNA覆盖度 / 感染效率(30%)
6
不好感染的文库细胞如何保证sgRNA覆盖度？
①优化病毒感染方法（如离心感染，添加助感染试剂等），降低病毒感染MOI。 ②预实验摸索病毒感染效率，确定合适的病毒感染MOI。
7
药物筛选为什么要进行预实验？
药物筛选进行预实验的目的是为了找到合适的药物筛选浓度；避免药物筛选浓度过低对细胞无明显的杀伤作用，或者药物筛选浓度过高导致大量细胞死亡，从而难以收集到足量细胞进行下游NGS测序分析。
8
一般药物筛选推荐多少天，耐药株筛选一般选正筛还是负筛？
一般推荐药物筛选时长不低于2周。对于敲除文库，在NGS测序分析的负向筛选中，富集的基因即是该药物潜在的耐药基因靶点；对于激活文库，在NGS测序分析的正向筛选中，富集的基因即是该药物潜在的耐药基因靶点。
9
文库细胞筛选的方式有哪些？
文库细胞筛选有传代培养、药物筛选、病毒感染、流式分选、体内筛选等多种方式。
点击获取CRISPR文库筛选指南>>

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    文库种类: 敲除文库
    货号: LIBR-H001AB-P002;LIBR-H001AB-P100;LIBR-H001AB-P200;LIBR-H001AB-P500
    规格: 2ug;100ug;200ug;500ug
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CRISPR-iScreen™文库病毒

  • EZ-editor™ 人全基因组敲除文库病毒(单质粒系统A+B)

    EZ-editor™ 人全基因组敲除文库病毒(单质粒系统A+B)
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    文库种类: 敲除文库
    货号: LIBR-H001AB-LV1000;LIBR-H001AB-LV5000;LIBR-H001AB-LV10000
    规格: 1*10^8TU;5*10^8TU;1*10^9TU
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CRISPR-iScreen™Cell Pool

  • hGeCKO Library AB#1 in HGC-27

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    细胞名称: HGC-27
    货号: LIBR-H002AB-C300D38
    规格: 300x
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  • hGeCKO Library AB#1 in AGS

    hGeCKO Library AB#1 in AGS
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    细胞名称: AGS
    货号: LIBR-H002AB-C300D37
    规格: 300x
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  • hGeCKO Library AB#1 in PC-3

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    细胞名称: PC-3
    货号: LIBR-H002AB-C300D36
    规格: 300x
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CRISPR文库服务
提供CRISPR-KO、CRISPRa、CRISPRi三大定制文库从高通量sgRNA文库构建到病毒包装、细胞转染、药物筛选、高通量测序和数据分析等一站式服务，多种交付方式满足不同科研需求。
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细胞：293T

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Ubigene CRISPR文库细胞应用了CRISPR iScreen™技术，用自主研发的高效感受态制备覆盖度高和均一性好的文库质粒，再用慢病毒包装试剂盒YK-LVP-20进行病毒包装，获得高滴度的CRISPR文库病毒，最后经过源井独家Cell Pool工艺，用低病毒MOI感染目的细胞系，控制每个细胞只进一个病毒，批量构建标准化的CRISPR文库细胞。Ubigene CRISPR文库细胞批间差异小、重复性好，对其进行不同的压力条件筛选，可筛选到适用于不同领域研究的靶基因。

产品信息

文库名称
EZ-editor™ 人全基因组敲除文库(单质粒系统A+B)
产品名称
hGeCKO Library AB#1 in 293T
细胞名称
293T
物种
Human
细胞形态
上皮样, 贴壁细胞
药筛浓度
Puromycin 1μg/mL
培养基
90% DMEM+10%FBS
靶向基因
19050
gRNA数量
123411
非靶标对照sgRNA数量
1000
细胞图片
细胞接收
EZ-editor™ CRISPR 文库稳转株均以冻存细胞的形式进行运输，收到后请立即转入液氮储存或短暂（24H)放至-80℃冰箱保存，或直接进行细胞复苏。
CRISPR iScreen™产品优势
  • 35种文库
    近100种Cas9细胞
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    1
  • 质粒
    覆盖度>99%,均一性＜10
    使用自主研发感受态细胞，更易捕获外源DNA，转化效率高且突变风险低。
    2
  • Cell Pool
    覆盖度高达99%
    独家Cell Pool制备工艺,实现规模化、标准化生产，确保批间差异小、重复性好。
    3
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1
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文库细胞cell pool需要通过NGS测序检测sgRNA的覆盖度，一般sgRNA覆盖度需>90%，此外，源井生物文库细胞cell pool现货会进行菌检、支原体检测以及细胞复苏验证等环节，确保细胞高质量交付。
2
为什么要选择病毒感染效率为30%的MOI作为文库细胞构建实验的病毒感染条件？
在文库细胞构建时，应尽可能保证每个细胞只进入一条sgRNA。细胞存活比例为30%意味着约30%的细胞被病毒感染，这种情况下一个细胞被多个病毒感染的概率大大降低。
3
交付的文库细胞cell pool可以再继续扩增吗？
文库细胞cell pool可以继续扩增，但是建议扩增代次不超过5代，如果扩增代次过高会导致文库细胞中的sgRNA覆盖度降低。
4
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5
怎么计算病毒感染所需的野生型细胞数量？
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6
不好感染的文库细胞如何保证sgRNA覆盖度？
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7
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药物筛选进行预实验的目的是为了找到合适的药物筛选浓度；避免药物筛选浓度过低对细胞无明显的杀伤作用，或者药物筛选浓度过高导致大量细胞死亡，从而难以收集到足量细胞进行下游NGS测序分析。
8
一般药物筛选推荐多少天，耐药株筛选一般选正筛还是负筛？
一般推荐药物筛选时长不低于2周。对于敲除文库，在NGS测序分析的负向筛选中，富集的基因即是该药物潜在的耐药基因靶点；对于激活文库，在NGS测序分析的正向筛选中，富集的基因即是该药物潜在的耐药基因靶点。
9
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    规格: 2ug;100ug;200ug;500ug
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    规格: 1*10^8TU;5*10^8TU;1*10^9TU
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